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果树研究所专家揭示转录因子MdAIL5调控苹果不定芽形成的机制

 

近日,中国农业科学院果树研究所苹果分子育种课题组研究发现转录因子MdAIL5苹果不定芽再生的关键调控基因,通过苹果遗传转化进行功能验证,并筛选其互作蛋白及下游基因,发现以MdAIL5为核心的调控网络。相关成果发表在园艺学JCR一区期刊《园艺研究(Horticulture Research)》(IF8.7)上。

高效遗传转化体系是利用转基因和基因编辑等生物育种技术培育具有重要性状苹果新种质或新品种的基础。不定芽再生能力是果树遗传转化的关键所在,但目前关于果树不定芽再生相关机制认识尚十分有限。

本研究以‘GL-3’苹果为试材,通过RNA-SeqRT-qPCR联合分析筛选得到调控苹果不定芽形成的关键转录因子MdAIL5。遗传转化试验结果表明,MdAIL5过表达可将苹果叶片不定芽再生效率提高4-6倍不定根再生效率提高3-5倍。此外,MdAIL5过表达还可增强高成熟度叶片再生能力。高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和转录组测序结果均表明,MdAIL5影响苹果植株中生长素、细胞分裂素等相应激素的表达。进一步利用EMSA、酵母单杂交、双荧光素酶报告、酵母双杂交等实验证明,MdAIL5直接结合MdHB14MdARF9启动子并激活其表达,MdHB14增强MdARR20MdWUS1的激活作用,从而正调控苹果叶片不定芽再生。本研究初步明确了MdAIL5转录因子参与苹果叶片不定芽再生的调控网络,有利于提高苹果叶片不定芽再生和遗传转化效率,为苹果功能基因验证和优异种质创新奠定基础。

该研究得到国家苹果产业技术体系(CARS-27)、国家自然科学基金(32202463)以及中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2021-RIP-02)等项目资助。

原文标题:MdAIL5 overexpression promotes apple adventitious shoot regeneration by regulating hormone signaling and activating the expression of shoot development-related genes


 

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